TN5转座酶

概述：robusttn5转座酶是野生型tn5转座酶的高活性突变体，可以高效的将tn5转座子插入到目标序列。robusttn5转座酶识别tn5转座子酶序列的内端（inside end，ie）、外端（outside end，oe）和嵌合端（mosaicend，me）序列，含有me序列片段的体外转座效率最高(1)。robusttn5转座酶的插入位点具有很高的随机性(2)，因此被广泛的用于体外转基因（外源基因整合到宿主细胞）和二代测序建库等领域。
来源：含有robust tn5转座酶序列的大肠杆菌菌株。
应用：体外转基因（外源基因整合到宿主细胞），二代测序建库。
贮存溶液：50 mm tris-hcl (ph 8.0 @ 25 °c)，100 mm nacl，0.1 mm edta，0.1%triton x-100和50%甘油(v/v)。
反应缓冲液：（随酶提供）10x转座反应缓冲液。
单位定义：1单位robust tn5转座酶指37°c条件下反应1小时，完全切割1μg含有识别序列的dna片段所需要的酶量。
应用：
体外转基因操作:robusttn5转座酶可以将含有成对识别序列的双链dna片段（如下图所示）随机整合到宿主细胞的基因组中。整合的过程分为两步：首先，robusttn5转座酶同含有选择标记和识别序列的目标基因片段结合，形成转座体（transposome）；之后，通过转化的方式将转座体导入宿主细胞，利用选择标记筛选成功整合目标基因的宿主细胞

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