猪蓝耳病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【产品名称】
通用名：猪蓝耳病毒igg抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：diagnostic kit for antibodies to porcine reproductive and respiratory syndromevirus (elisa)
【包装规格】 96t/盒
【预期用途】
本试剂盒用于检测猪血清中猪蓝耳病毒抗体。评估猪场猪蓝耳苗免疫状况，感染猪的血清学诊断。
【原    理】
本试剂盒系由预包被猪蓝耳病毒（prrsv）gp5+gp6重组蛋白的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（elisa）原理检测猪血清或血浆中猪蓝耳病毒特异性抗体。实验时，在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清，经温育后，若样品中含有猪蓝耳病毒的特异性抗体，则将与包被板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加tmb底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有特异性抗体。
【试剂盒组成】
1.
猪蓝耳病毒抗原预包被微孔板条
96t×1
2.
酶标记物  (红盖)
11ml×1
3.
样品稀释液  (黄盖)
25ml×1
4.
20x浓缩洗涤液  (透明盖)
20ml×1
5.
底物液a  (白盖)
6ml×1
6.
底物液b  (黑盖)
6ml×1
7.
终止液  (黄盖)
6ml×1
8.
阳性对照 (红盖，已灭活)
0.5ml×1
9.
阴性对照 (绿盖，已灭活)
0.5ml×1
10.
盖板膜
1张
11.
自封袋
1个
12.
说明书
1份
【样品制备】  取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品短期可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
【样品稀释】  用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【试验操作方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl；样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl；空白对照孔不加。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加显色剂a、显色剂b各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(630nm作参比波长）测定各孔吸光值（a450）。
【结果判定】
    定义：n=阴性对照孔平均a值；p=阳性对照孔平均a值；s=样品孔a值；s/p=样品孔a值/阳性对照孔平均a值。
1.正常情况下，n≤0.10，p≥0.50。
2.s/p≥0.18时判为阳性，s/p＜0.15时判为阴性，0.15≤s/p＜0.18时判为可疑。当本实验结果为阴性时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
   该试验仅作为定性检测猪蓝耳病毒igg抗体，不能区别疫苗免疫和野毒感染。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.微孔板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的微孔板需放入有干燥剂的密封袋中保存(包被板开封后请于2～8℃避光保存，使用期限为1个月)。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
【储  存】
原包装应储存于2～8℃保鲜冷藏，切勿冷冻。
【有效期】
有效期12个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装。

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苏州艾瑞德生物科技有限公司销售部
盛经理
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东吴北路31号吴中科技创业园B幢201室

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