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1.概要
氯霉素(chloramphenicol)是一种常用光谱抗生素,通过抑制细菌蛋白质合成而发挥抑茵作用,对畜禽疾病控制和治疗有重要功效,但由于氯霉素存在严重的副作用,可抑制人体骨髓的造血功能,从而引起再生障碍性贫血,粒细胞及血小板减少症,欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。本试剂盒是应用免疫学原理建立的一种特异敏感的检测方法。
2.适用范围
可定性、定量检测水产品、肉类、蜂蜜、牛奶、蛋类及饲料等样本中的氯霉素。
3.试验原理
本试剂盒采用免疫竞争法定量检测氯霉素。预先在微孔中包被氯霉素抗原(cap-bsa),实验时加入氯霉素标准品或待测样本和氯霉素酶标抗体,作用一段时间后,待测样品中的氯霉素与微孔板上的氯霉素抗原竞争溶液中的酶标抗体,没有与微孔板上的抗原结合的酶标抗体被洗去,再加入显色底物,作用一段时间后,结合的酶将底物转化为蓝色的产物,加入终止液后颜色由蓝变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中氯霉素含量成反比。
4.结果判定
(1)百分吸光率的计算,标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以第一个标准(0标准)的吸光度值,再乘以100%,即
百分吸光度值(%)=(b/b0)×100%
b—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
b0—0(ppb)标准溶液的平均吸光度值
(2)标准曲线的绘制与计算
以标准品百分吸光率为纵坐标,以氯霉素标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中氯霉素抗原实际量。
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